薄膜过滤法，滤膜孔径探究

　　薄膜过滤法是《中国药典（2015年版）》所收载的无菌和微生物限度检查法中的检验方法之一，薄膜过滤法主要起到富集微生物、分离去除样品中对微生物生长产生干扰的因素的作用，可以快速集菌和消除药品中某些抑菌成分，在药品微生物检查方法验证和药物制剂中回收微生物的验证中都可以作为实验方法之一，由于该方法简便、快速，可以有效提高检查结果的灵敏度和可靠性，是近年来微生物检查领域中日益广泛应用的一种技术手段。薄膜过滤法通过使用一定孔径的滤膜从液体中截留微生物，然后将滤膜放在相应培养基平板上或液体培养基中，使该微生物恢复成长为菌落，最后对其进行计数、鉴定等。

　　薄膜过滤是微孔筛分，孔径关系到微生物的截留率，流速和恢复生长率，大于孔径的微粒均被截留。目前市面上滤膜孔径有0.22μm 、0.45μm、0.7μm、0.8μm 、1.2μm等。在《中国药典》就规定了薄膜过滤法采用的滤膜孔径应不大于0.45μm，为什么在那么多孔径中会选择这个孔径呢？主要是由于大部分微生物粒子大小为0. 5μm-2.0μm，只要选用0.45μm微孔滤膜即可将微生物截留去除，细菌、真菌就能截留下来，因此0.45μm最常用在微生物限度、无菌检查中。那为什么不选用0.22μm呢？孔径更小截留的微生物效果不是更好吗？主要是有研究表明不同膜孔径截留的微生物平均恢复生长率不同，0.22μm恢复生长率低于0.45μm恢复生长率，0.45μm恢复生长率在100%以上。在实际检验中也会遇到某些药品制备的供试液中有一些不能通过滤膜的颗粒存在，造成滤膜堵塞。综合参考以上因素，0.45μm滤膜能够提供较好的截留率，更好的流速和广谱微生物稳定的恢复生长率，因此药典对滤膜孔径规定使用不大于0.45μm孔径滤膜。但微生物粒子小于0.45μm，比如病毒、热原体等，则用0.22μm孔径滤膜。

　　 注：文章参考《膜过滤技术在微生物检测中的应用》(默克)，图片来源本实验室和网络。