药品微生物检验用培养基配制中质量控制要点（2）

       药品检验用培养基质量控制包含很多环节和因素，前文主要介绍了培养基配制前需要注意的事项，本文则主要针对培养基称量、溶解、分装和灭菌等培养基配制过程中的质量控制要点进行介绍。

       1.培养基称量

       脱水培养基使用前应检查粉末或颗粒的流动性、均匀性、结块情况和色泽等，确认培养基状态正常后再进行称量。称量时，应首先调节天平至水平，再放上适宜器皿并归零，然后按照培养基标签说明，用药匙舀出适量培养基至器皿中。称量完毕后应做好天平和操作台面的清洁工作。

       脱水培养基要做到即开即用，用完后应及时拧紧培养基瓶盖，防止培养基受潮。操作人员在称量时应佩戴好口罩，做好个人防护措施。

       2.培养基溶解

       培养基溶解应分为两步走，量取全量水后，先加部分水量（约1/2），将粉末或颗粒搅拌均匀，再加水至全量。培养基如果需要加热溶解，则既要避免过度加热，又要保证充分溶解。

       如果采用化学试剂配制培养基，应按《中国药典》规定的处方配制，所使用的化学试剂需用化学纯级别。

       3.调整pH值

       应确保每批培养基灭菌后的pH值（冷却至25℃左右测定）在规定范围内。若培养基处方中未列出pH值的范围，除非经验证表明培养基的pH值允许的变化范围很宽，否则，pH值的范围不能超过规定值的±0.2。

       如果基于实验室灭菌设备及条件，确实需要对pH进行调节时，建议灭菌前调节pH值，可根据各培养基对pH的要求，用1mol/L NaOH或1mol/L HCL溶液（也可用10%碳酸钠溶液或15%冰醋酸溶液）调节pH值。需要注意的是，调节pH时应慢慢滴加稀酸或稀碱，边加边测，最好不要来回矫正。

       4. 4.分装

       培养基调整好pH值后，就要进行分装。分装时需考虑蒸发量，装量要有预留，液体和半固体的分装量不超过容器体积的1/3到2/5，固体分装量不超过容器体积的1/2。分装好后，每瓶均贴上灭菌指示带，在瓶身或者包裹瓶口的牛皮纸上标记名称、批号、配制日期等信息。

       5.灭菌

       药品微生物检验用的培养基大部分是需要高温高压灭菌后使用的，如胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）和硫乙醇酸盐流体培养基（FTM)等。也有部分培养基因为配方里含有不耐高温的物质，如肠道菌增菌液体培养基、紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基和木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基，这些培养基可以在加热煮沸后直接使用，不需要高温高压灭菌。还有个别不耐热的特殊培养基，可以采用过滤除菌法，用物理阻留的方法除去培养基中的细菌。需要注意的是，灭菌时应使用灭菌指示条等指示剂对灭菌效果进行监测，以保证灭菌系统工作正常，灭菌效果良好。

参考文献：

1.国家药典委员会.中华人民共和国药典2020版四部[S]9203药品微生物实验室质量管理指导原则.

2.微生物培养基质控与图解[M].北京：北京科学技术出版社，2006.

3.董勇.药品微生物检验实验室质量控制策略分析[J].中国处方药,2018（16）07.